賽默飛Thermo LightCycler® 480 II 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀介紹

賽默飛（Thermo Fisher Scientific）的LightCycler® 480 II實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀是一款高性能、多功能的PCR檢測(cè)儀器，專(zhuān)為基因表達(dá)研究、基因分型、拷貝數(shù)變異分析、突變檢測(cè)等實(shí)驗(yàn)需求而設(shè)計(jì)。作為分子生物學(xué)研究中廣泛應(yīng)用的儀器之一，LightCycler® 480 II以其高通量、高靈敏度、強(qiáng)大的多重檢測(cè)能力以及快速熱循環(huán)技術(shù)，在科研、臨床和工業(yè)檢測(cè)領(lǐng)域表現(xiàn)出色。

一、儀器概述

LightCycler® 480 II實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀結(jié)合了先進(jìn)的光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)與快速溫控技術(shù)，是一款為高精確度核酸定量分析而設(shè)計(jì)的設(shè)備。該儀器支持96孔和384孔反應(yīng)板，能夠適應(yīng)不同規(guī)模的實(shí)驗(yàn)需求，同時(shí)以其出色的熒光檢測(cè)能力和數(shù)據(jù)分析功能，為分子生物學(xué)研究提供了可靠的技術(shù)平臺(tái)。

這款設(shè)備可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)PCR擴(kuò)增過(guò)程中熒光信號(hào)的變化，幫助研究人員動(dòng)態(tài)、定量分析目標(biāo)基因的表達(dá)或突變狀態(tài)。無(wú)論是基礎(chǔ)研究還是臨床診斷，LightCycler® 480 II都能夠?yàn)榭茖W(xué)家提供高效、穩(wěn)定和可靠的數(shù)據(jù)支持。

二、技術(shù)特點(diǎn)

1. 高性能光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)

LightCycler® 480 II配備高靈敏度光學(xué)模塊，支持多通道熒光檢測(cè)，可對(duì)多個(gè)目標(biāo)基因進(jìn)行同時(shí)監(jiān)測(cè)。

• 高靈敏度檢測(cè)：適合低豐度基因的分析，可靈敏檢測(cè)低拷貝數(shù)樣本。

• 多通道支持：支持多達(dá)5種熒光染料的同時(shí)檢測(cè)，適合多重PCR實(shí)驗(yàn)。

• 熒光染料兼容性：支持SYBR Green、TaqMan探針、EvaGreen以及其他常見(jiàn)熒光標(biāo)記物。

2. 快速熱循環(huán)技術(shù)

LightCycler® 480 II采用高效熱循環(huán)模塊，能夠快速升溫和降溫，大幅度縮短PCR實(shí)驗(yàn)時(shí)間，提高檢測(cè)效率。

• 快速反應(yīng)速度：每次實(shí)驗(yàn)的反應(yīng)時(shí)間顯著縮短，同時(shí)保持較高的擴(kuò)增效率。

• 精確溫控系統(tǒng)：溫控精度達(dá)到±0.1°C，確保PCR擴(kuò)增的高穩(wěn)定性和重復(fù)性。

3. 多通量配置

該儀器支持兩種孔板配置，滿(mǎn)足不同實(shí)驗(yàn)室規(guī)模需求：

• 96孔板：適合中等規(guī)模實(shí)驗(yàn)和科研使用。

• 384孔板：為高通量實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，支持大規(guī)模篩查和復(fù)雜檢測(cè)。

4. 智能數(shù)據(jù)分析

LightCycler® 480 II配備功能全面的數(shù)據(jù)分析軟件，能夠滿(mǎn)足用戶(hù)的多樣化數(shù)據(jù)處理需求。

• Ct值分析：快速、準(zhǔn)確地識(shí)別循環(huán)閾值（Ct值），提供可靠的擴(kuò)增曲線(xiàn)。

• 熔解曲線(xiàn)分析：用于擴(kuò)增反應(yīng)的特異性驗(yàn)證，幫助識(shí)別非特異性產(chǎn)物或污染。

• 絕對(duì)與相對(duì)定量：支持基于標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的絕對(duì)定量以及2^-ΔΔCt法的相對(duì)定量分析。

• 突變檢測(cè)和基因分型：支持高分辨率熔解曲線(xiàn)（HRM）分析，用于基因突變檢測(cè)和基因分型研究。

5. 靈活性與兼容性

LightCycler® 480 II儀器設(shè)計(jì)靈活，適應(yīng)多種實(shí)驗(yàn)類(lèi)型和需求：

• 多種反應(yīng)模式：支持標(biāo)準(zhǔn)PCR、實(shí)時(shí)定量PCR、多重PCR、熔解曲線(xiàn)分析等。

• 兼容不同實(shí)驗(yàn)條件：支持多種熒光標(biāo)記體系和反應(yīng)方案。

• 自動(dòng)化擴(kuò)展：可與實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化設(shè)備集成，進(jìn)一步提高實(shí)驗(yàn)效率。

三、核心功能

1. 基因表達(dá)分析

LightCycler® 480 II能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)控基因表達(dá)水平的變化，適用于各種基因表達(dá)研究場(chǎng)景。

• 相對(duì)定量：對(duì)樣本間基因表達(dá)水平差異進(jìn)行分析。

• 絕對(duì)定量：通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)直接計(jì)算基因拷貝數(shù)。

2. 突變檢測(cè)

該儀器可以靈敏檢測(cè)低頻率突變，適用于點(diǎn)突變、插入/缺失突變等多種基因突變類(lèi)型的研究。

• HRM分析：高分辨率熔解曲線(xiàn)技術(shù)能夠高效區(qū)分樣本中的突變和野生型序列。

• 單核苷酸多態(tài)性（SNP）檢測(cè)：快速準(zhǔn)確識(shí)別樣本中的特定基因變異。

3. 基因分型

LightCycler® 480 II支持基因分型實(shí)驗(yàn)，通過(guò)分析熒光信號(hào)，對(duì)樣本進(jìn)行遺傳多態(tài)性分型。

4. 拷貝數(shù)變異（CNV）分析

通過(guò)定量PCR實(shí)驗(yàn)，該儀器能夠檢測(cè)基因組中目標(biāo)基因的拷貝數(shù)變化，幫助研究拷貝數(shù)擴(kuò)增或缺失的基因。

5. 病毒載量檢測(cè)

LightCycler® 480 II被廣泛應(yīng)用于病毒載量分析，通過(guò)定量檢測(cè)病毒核酸，監(jiān)測(cè)感染狀況和治療效果。

四、技術(shù)參數(shù)

以下為L(zhǎng)ightCycler® 480 II的主要技術(shù)參數(shù)：

五、儀器優(yōu)勢(shì)

1. 高靈敏度與高通量

LightCycler® 480 II具檢測(cè)靈敏度和高通量能力，可同時(shí)處理大批量樣本，顯著提高實(shí)驗(yàn)效率。

2. 多功能性

該儀器支持多種實(shí)驗(yàn)類(lèi)型，包括基因表達(dá)分析、基因分型、突變檢測(cè)和拷貝數(shù)分析等，覆蓋了絕大多數(shù)PCR應(yīng)用場(chǎng)景。

3. 操作簡(jiǎn)便

儀器的設(shè)計(jì)注重用戶(hù)體驗(yàn)，配套軟件界面直觀(guān)，實(shí)驗(yàn)設(shè)置和數(shù)據(jù)分析簡(jiǎn)便易用。

4. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠

高精度的溫控系統(tǒng)和靈敏的光學(xué)模塊確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。

5. 靈活的擴(kuò)展能力

兼容多種耗材和反應(yīng)方案，支持與自動(dòng)化工作站集成，適應(yīng)不同實(shí)驗(yàn)室的需求。

六、應(yīng)用領(lǐng)域

LightCycler® 480 II在多個(gè)領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用：

1. 基礎(chǔ)研究

• 基因表達(dá)調(diào)控研究

• 基因功能研究

• 遺傳多樣性分析

2. 醫(yī)學(xué)研究

• 腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)

• 遺傳疾病相關(guān)基因分析

• 病毒載量檢測(cè)和病原體定量

3. 藥物開(kāi)發(fā)

• 藥物基因組學(xué)研究

• 個(gè)體化醫(yī)療相關(guān)基因研究

• 藥物代謝相關(guān)基因分型

4. 工業(yè)檢測(cè)

• 食品安全檢測(cè)中的病原體分析

• 環(huán)境樣本中的微生物檢測(cè)

七、總結(jié)

賽默飛LightCycler® 480 II實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀憑借其高靈敏度、多通道檢測(cè)、快速熱循環(huán)技術(shù)和強(qiáng)大的數(shù)據(jù)分析能力，成為分子生物學(xué)和基因組學(xué)研究中的重要工具。它不僅能夠滿(mǎn)足基礎(chǔ)科研需求，還在臨床和工業(yè)檢測(cè)領(lǐng)域發(fā)揮了重要作用。

無(wú)論是小規(guī)模實(shí)驗(yàn)還是大規(guī)模高通量篩查，LightCycler® 480 II都能夠?yàn)橛脩?hù)提供可靠的結(jié)果和高效的實(shí)驗(yàn)體驗(yàn)，為基因研究和診斷提供全面的技術(shù)支持。